産品信息
規格 | 100μg/支 |
貨号 | Gab-202203 |
反應物種 | Human, Mouse, Rat, Other (Wide Range) |
産品應用 | DB |
推薦稀釋比 | DB 1:500 - 1:2000 |
存儲緩沖液 | Store at -20℃. Avoid freeze / thaw cycles. |
Buffer: PBS with 0.02% sodium azide,50% glycerol,pH7.3. | |
純化方式 | Affinity purification |
抗原信息
免疫原 | Chemical compounds corresponding to N4-acetylcytidine |
序列 | Email for sequence |
靶點背景信息
RRID | AB_2862441 |
實驗步驟
Dot Blot檢測标準操作流程.
一(yī)、實驗儀器試劑和(hé)耗材
二、實驗步驟
Dot Blot檢測采用NC膜,取NC膜裁成6.5cm寬長(cháng)條,并在其上畫長(cháng)寬為(wèi)1cm×1cm正方形小格(在膜上面的(de)藍色紙上畫,畫格時膜(白色)與藍色紙必須完全重疊,讓藍色紙上的(de)正方形小格能在膜上留下正确的(de)劃痕)。
将不同濃度的(de)多肽稀釋為(wèi)成50ng/ul(稀釋為(wèi)需要的(de)濃度即可(kě))。
揭開膜上面的(de)藍色保護紙,用移液器吸取50ng/μL多肽稀釋液2ul點在膜上1cm×1cm正方形小格中心,即多肽包被量為(wèi)100ng(包被量根據需求調整)。點樣完成後,将NC膜放入37℃烘箱中30min。
把膜放入相應的(de)大小的(de)抗體孵育容器中,加入适量Blocking Buffer室溫封閉1h。
封閉結束10min前,用Antibody Dilution Buffer稀釋一(yī)抗備用。封閉結束後去(qù)除封閉液,加入稀釋好的(de)一(yī)抗工作液,室溫2h或4℃過夜。
去(qù)除一(yī)抗工作液,加入适量TBST Buffer洗雜4次,5min/次。
洗雜結束前10min,用Antibody Dilution Buffer稀釋二抗備用。去(qù)除TBST Buffer,加入稀釋好的(de)二抗工作液,室溫1h。
去(qù)除二抗工作液,加入适量TBST Buffer洗雜4次,5min/次。